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K1622逆轉(zhuǎn)錄酶活性測定方法

更新時間:2020-01-15 點(diǎn)擊次數(shù):2487次
  K1622逆轉(zhuǎn)錄酶--種依賴于RNA的DNA聚合酶,是逆轉(zhuǎn)錄病毒(如艾滋病病毒、乙肝病毒等)*的酶,因此通常成為艾滋病和病毒性肝炎等逆轉(zhuǎn)錄病毒所引發(fā)疾病的藥物作用靶點(diǎn),其抑制劑有核苷類似物和非核苷類物質(zhì),前者具有較強(qiáng)毒性且已產(chǎn)生耐藥性,進(jìn)一步尋找非核苷類RT抑制劑對艾滋病和病毒性肝炎等逆轉(zhuǎn)錄病毒所致疾病的治療具有重要意義。
  K1622逆轉(zhuǎn)錄酶試劑盒使用的RevertAidReverse Transcriptase具有的RNase H活性比AMV reverse transcriptase低。試劑盒配套提供的重組RiboLock™RNase Inhibitor有效保護(hù)RNA模板免于降解。該產(chǎn)品與逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)*兼容,因?yàn)槠湓?0°C時仍然保持活性。試劑盒配套提供oligo(dT)18和隨機(jī)六聚體引物。oligo(dT)18與mRNA的poly(A)尾選擇性結(jié)合。隨機(jī)六聚體引物轉(zhuǎn)錄無需poly(A)尾,因此可轉(zhuǎn)錄mRNA的5’-端區(qū)域,也可以無poly(A)尾的RNA(micro RNAs)為模板合成cDNA。試劑盒也可使用基因特異性引物。
  K1622逆轉(zhuǎn)錄酶活性測定方法:根據(jù)Pyral14等所報道的方法以MSRNA為模板,在有外源RT作用時產(chǎn)生cDNA,再用PCR方法進(jìn)行擴(kuò)增從而檢測RT活性,該方法稱為(PERT是目前*的檢測RT的敏感方法,也是WHO推薦的用以檢測生物制品的逆轉(zhuǎn)錄病毒的方法。由于逆轉(zhuǎn)錄病毒能夠傳染人及多種物種,引起免疫缺陷、白血病和淋巴細(xì)胞癌等多種疾病所
  以生物制品的逆轉(zhuǎn)錄病毒的安全檢定非常重要?;钚詼y定是檢定逆轉(zhuǎn)錄病毒的方法之一,與其他測定方法相比具有費(fèi)用低方法簡單,且可隨時測定單個樣本不需等待成批樣本同時測定等優(yōu)點(diǎn)。因此,反映病毒毒力的活性測定在HIV致病性及治療等研究中具有重要意義。

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