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使用人干擾素調(diào)節(jié)因子的注意事項(xiàng)是什么

更新時(shí)間:2020-10-19 點(diǎn)擊次數(shù):1592次
  人干擾素調(diào)節(jié)因子可與干擾素基因中順式元件結(jié)合,調(diào)控干擾素及干擾素激活基因(ISG)的表達(dá)。因此,干擾素調(diào)節(jié)因子在機(jī)體抗病毒感染、調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)等方面有重要意義。
  應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人干擾素調(diào)節(jié)因子1(IRF1)水平。用純化的人干擾素調(diào)節(jié)因子1(IRF1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入干擾素調(diào)節(jié)因子1(IRF1),再與HRP標(biāo)記的羊抗人抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的干擾素調(diào)節(jié)因子1(IRF1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人干擾素調(diào)節(jié)因子1(IRF1)濃度。
  使用人干擾素調(diào)節(jié)因子的注意事項(xiàng)如下:
  1、試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
  2、實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
  3、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
  4、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
  5、使用干凈的塑料容器配置洗滌液,使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
  6、洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
  7、底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。
  8、加入試劑的順序應(yīng)一樣,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
  9、按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

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021-65672052
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